碘化丙啶(PI)溶液（50ug/ml）

產(chǎn)品簡介：

碘化丙啶（PI）是一種核酸熒光染料，它不能透過完整的細胞膜，但能夠透過死細胞和凋亡中晚期細胞的細胞膜而使細胞核染色。因此，PI 作為熒光探針常用于細胞凋亡（apoptosis）或細胞壞死（necrosis） 的檢測。在流式細胞分析中，PI 常與其他染料如Calcein-AM、Hoechst 33258 或Hoechst 33342 聯(lián)合使用，來區(qū)分凋亡早晚期細胞以及死細胞。此外，PI 也常作為多色熒光染色的復染劑使用。

產(chǎn)品描述:

本產(chǎn)品為液體(1X)，已經(jīng)過 0.1μm過濾，不含細菌、支原體等。

規(guī)格:10mL/支

有效期: 12個月

儲存條件：-20℃

運輸條件：低溫運輸

使用說明

1. 用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測，常用于流式細胞儀分析；

2. 常被用來與 Calcein, AM、Hoechst 33258 或 Hoechst 33342 等一起使用，能同時對活細胞和死細胞染色。

操作步驟

操作步驟（僅供參考）：

細胞樣品的制備：

(1) 貼壁細胞：

① 收集上述細胞懸液到離心管內(nèi)。

② 4℃離心，使細胞沉到管底。小心吸取上清并丟棄，可留大約 50ul 培養(yǎng)液，以免吸走細胞，

③ 加入約1ml 提前預冷的PBS，重懸細胞，并轉(zhuǎn)移至 1.5ml 無菌離心管。

④ 4℃離心，使細胞沉到管底。

⑤ 小心吸取上清并丟棄，可留大約 50ulPBS，以免吸走細胞。

⑥ 輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。

(2) 懸浮細胞：

① 4℃離心，使細胞沉到管底。

② 小心吸取上清并丟棄，可留大約 50ul 培養(yǎng)液，以免吸走細胞。

③ 加入約1ml提前預冷的 PBS, 重懸細胞，并轉(zhuǎn)移至 1.5ml 無菌離心管。

④ 4℃離心，使細胞沉到管底。

⑤ 小心吸取上清并丟棄，可留大約 50ul PBS， 以免吸走細胞。

⑥ 輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。

細胞的固定：加入1ml冰浴預冷70%乙醇中，輕輕吹打混勻，4℃條件下        

固定2h或更長時間。4C固定 12~24h 可能效果更佳。

（3）細胞的清洗：

① 4℃離心，使細胞沉到管底。

② 小心吸取上清并丟棄，可留大約 50 ul 溶液，以免吸走細胞

③ 加入約1ml 提前預冷的 PBS，重懸細胞，并轉(zhuǎn)移至1.5ml 無菌離心管。

④ 4℃離心，使細胞沉到管底。

⑤ 小心吸取上清并丟棄，可留大約 50ul PBS,以免吸走細胞。

（4）PI染色：在每個待檢細胞樣品中加入 500ul 配制好的PI染色工作液，輕輕重懸細胞沉淀，置于37℃避光水浴 30min.

（5）檢測與分析：用流式細胞儀在激發(fā)波長 488nm 波長處檢測紅色熒光，同時檢測光散射情況。采用適當分析軟件進行細胞 DNA或 RNA 含量分析和光散射分析。

注意事項

1、熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測。

2、為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

3、在為了獲得細胞沉淀的離心的過程中，對于特殊細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當提高離心力或延長離心時間。

4、如果用于組織的細胞周期與細胞調(diào)亡檢測，則必須把組織消化后，制備成單細胞懸液，才可以進行檢測，

5、可溶于水或 DMSO。本品用 DMSO 溶解，因 DMSO的熔點是 18.5℃，使用前請放置到室溫充分溶解。

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