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脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染法的經(jīng)驗分享
脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染法的經(jīng)驗分享:1、轉(zhuǎn)染前1天將0.5~2×105細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板,并加入500ul不含抗生素的*培養(yǎng)基,以保證轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合達(dá)90~95%。2、準(zhǔn)備復(fù)合物(1)將0.8ugDNA稀釋于50ul無血清無抗生素的培養(yǎng)液中輕輕渾勻。(2)將2ulLipofect...
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2018-04-03
脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染法的詳細(xì)操作步驟分享
脂質(zhì)體2000的轉(zhuǎn)染操作步驟1、操作步驟[方法一]:(1)脂質(zhì)體2000的轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用2mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入1mL不含血清培養(yǎng)液。(2)細(xì)胞培養(yǎng):取6孔培養(yǎng)板(或用35mm培養(yǎng)皿),向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃CO2培養(yǎng)至40%~60%匯合...
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2018-03-19
脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染法的原理說明
脂質(zhì)體2000是陽離子脂質(zhì)體N-[1-2,3-Dioleyoxy,Propyl]-n,n,n-TrimethylammoniumChloride(DOTMA)和Dioleoylphotidye-thanolamine(DOPE)的混合物[1:1(w/w)]。它適用于把DNA轉(zhuǎn)染入...
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2018-02-07
CCK8試劑盒日本同仁在實驗中遇到的問題解答
CCK8試劑盒日本同仁在實驗中遇到的問題解答。1.CCK8試劑盒日本同仁一個孔中應(yīng)接種多少個細(xì)胞?當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時,貼壁細(xì)胞的zui小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于2,500個/孔(100μl培養(yǎng)基)。如果...
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2018-02-01
CCK8試劑盒日本同仁的檢測步驟
CCK8試劑盒日本同仁利用了同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開發(fā)的四唑鹽——WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-MethoxyPMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲臜染料。CCK-8溶液可...
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2018-01-17
葡聚糖凝膠柱的預(yù)處理、裝柱、加樣、洗脫收集與回收
1、葡聚糖凝膠柱的預(yù)處理稱取Sephadex葡聚糖凝膠(50-100目)約5g,加入蒸餾水100ml,置室溫下3h進(jìn)行溶脹。2、葡聚糖凝膠柱的裝柱凝膠層析柱的直徑與柱長之比一般為1:15。柱的底部用裝有細(xì)玻璃管的橡皮塞塞緊,用洗凈的玻璃絲(約200目尼龍布)墊底或購買類似規(guī)格的商...
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2014-12-15
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